Антитела к тканевой трансглутаминазе¶

Антитела к тканевой трансглутаминазе (Ат-tTG, anti-tTG) — класс аутоантител, направленных против фермента тканевой трансглутаминазы (tTG, также обозначаемой как TG2), который участвует в образовании ковалентных связей между белками. Определение уровня этих антител в сыворотке крови является основным лабораторным скрининговым тестом на целиакию — глютеновую болезнь, аутоиммунное заболевание тонкого кишечника, развивающееся у генетически предрасположенных лиц при употреблении глютена.

¶Тканевая трансглутаминаза

Тканевая трансглутаминаза (КФ 2.3.2.13) — фермент, катализирующий посттрансляционную модификацию белков: образование изоглутаминил-лизиновых изопептидных связей между молекулами с участием остатков глутамина и лизина. Фермент участвует в стабилизации внеклеточного матрикса, апоптозе, регуляции клеточной сигнализации и иммунных процессах. В кишечнике tTG играет ключевую роль в патогенезе целиакии: при расщеплении глютеновых пептидов фермент дезамидирует остатки глутамина в глутамат, что резко повышает аффинность пептидов к антигенам главного комплекса гистосовместимости HLA-DQ2 и HLA-DQ8, экспрессированным на антигенпрезентирующих клетках. Дезамидированные пептиды активируют CD4+ T-лимфоциты, запуская воспалительную реакцию слизистой оболочки тонкого кишечника.

¶Механизм образования

В норме иммунная толерантность к собственной tTG поддерживается несколькими механизмами. При целиакии происходит нарушение толерантности, и организм вырабатывает IgA- и IgG-антитела к ферменту. Считается, что образование Ат-tTG связано с трансглутаминазой-модифицированными глютеновыми пептидами: фермент, связываясь с пептидом, формирует комплекс, который воспринимается иммунной системой как чужеродный. Антитела могут быть направлены как непосредственно против фермента, так и против эпитопов, сформированных в результате его действия.

¶Клиническое значение

Основная область применения теста на Ат-tTG — диагностика целиакии. Согласно рекомендациям Европейского общества детских гастроэнтерологов, гепатологов и нутрициологов (ESPGHAN), а также российских клинических рекомендаций, определение IgA-антител к тканевой трансглутаминазе является первоочередным серологическим исследованием при подозрении на целиакию у детей и взрослых.

Ключевые характеристики теста:

Повышенный уровень Ат-tTG IgA характерен для активной целиакии. Титр антител коррелирует со степенью атрофии ворсин слизистой оболочки тонкого кишечника, что позволяет использовать тест для мониторинга соблюдения безглютеновой диеты: при успешной диетотерапии уровень антител снижается в течение 6–12 месяцев.

При дефиците IgA (встречается примерно у 2–3 % пациентов с целиакией) IgA-тест будет ложноотрицательным, поэтому одновременно определяют уровень общего IgA в сыворотке. В качестве альтернативы или дополнения используют IgG-антитела к tTG.

¶Дифференциальная диагностика

Повышение Ат-tTG может наблюдаться не только при целиакии. Ложноположительные результаты отмечаются при:

• аутоиммунном гепатите;
• болезни Крона;
• сахарном диабете 1 типа;
• синдроме Турнера;
• некоторых иммунодефицитных состояниях;
• инфекционных энтеритах;
• циррозе печени.

Для повышения специфичности диагностики рекомендуется комбинировать тест с определением антител против дезамидированных пептидов глютена (Ат-DGP) и антител против эндомизия (Ат-EMA). Антитела к эндомизию обладают высокой специфичностью (почти 100 %) и считаются подтверждающим тестом при положительном Ат-tTG.

¶Подготовка к анализу

Для получения достоверного результата рекомендуется сдавать кровь на фоне обычного рациона, содержащего глютен. Исключение безглютеновой диеты до сдачи анализа может привести к ложноотрицательному результату, так как синтез антител снижается при отсутствии антигенной стимуляции. Специальной подготовки (голодание, ограничение лекарств) не требуется, однако кровь сдаётся натощак, как правило, в утренние часы.

¶Ограничения теста

Несмотря на высокую диагностическую ценность, тест на Ат-tTG не является абсолютным критерием диагноза. Окончательное подтверждение целиакии требует морфологического исследования биоптатов слизистой оболочки тонкого кишечника (взятых из дистального отдела двенадцатиперстной кишки и проксимального отдела тощей кишки), демонстрирующих атрофию ворсин, гиперплазию крипт и увеличение числа интраэпителиальных лимфоцитов. В ряде случаев (например, при минимальных изменениях слизистой) возможна серологическая диагностика без биопсии — так называемая «небиопсийная» диагностика целиакии у детей, предусмотренная критериями ESPGHAN 2012 года.

¶История

Первые сообщения об аутоантителах к тканевой трансглутаминазе при целиакии появились в начале 1990-х годов. В 1997 году Диетер Вольц (Dieter Watzke) и коллеги описали высокую диагностическую ценность Ат-tTG как маркера заболевания. В 2000-х годах тест получил широкое распространение в клинической практике и вошёл в рекомендации по диагностике целиакии во многих странах, включая Россию.

¶Исторические источники

• Клинические рекомендации «Целиакия у детей» (Национальная гастроэнтерологическая ассоциация)
• Рекомендации ESPGHAN по диагностике и лечению целиакии
• Dieterich W. et al. Autoantibodies to tissue transglutaminase as predictors of celiac disease // Gastroenterology, 1998
• Лабораторная диагностика целиакии: методические рекомендации